琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作 , 因此正确地操作对整个实验来讲很有必要 , 大体流程如下:称量、熔胶、倒胶、拔梳 。
1、称量 我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数 , 即所称取的琼脂糖粉的质量克比所加的TBE缓冲液的体积毫升即胶的浓度 。缓冲液的体积根据胶板的大小而定 。如小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104克 , TBE13毫升;
2、熔胶 将所称量的琼脂粉与TBE在锥形瓶中混合 , 在微波炉内反复加热2到3次至琼脂粉溶解并无气泡;
【琼脂糖凝胶怎么配制】3、倒胶 干净的胶槽内摆好梳子 , 往胶内滴加1uL左右核酸染料 , 混匀 , 待冷却至不烫手 , 轻轻倒入胶板内 。
4、拔梳待大约20分钟后 , 轻轻拔掉梳子若不好拔 , 可以滴加适量的TBE缓冲液 。
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