反相高效液相色谱法反相高效液相色谱

什么叫反高效液相色谱法　高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相，采用高压输液系统，是色谱法的一个重要分支。
它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。这种方法已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术，是分析化学、生物化学和环境化学工作者手中必不可少的工具。

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反相高效液相色谱的固定相是什么，流动相有什么什么？反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂，常见的固定相是十八烷基键合硅胶，流动相是极性溶剂，常见的流动相是甲醇，乙腈。
反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系（正相色谱）相反。
RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶，典型的流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。反相色谱法适于分离非极性、极性或离子型化合物，大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。
扩展资料
【反相高效液相色谱法反相高效液相色谱】反相高效液相色谱的原理：
在反相键合相色谱法中使用的是非极性键合固定相。它是将全多孔(或薄壳)微粒硅胶载体，经酸活化处理后与含轻基链(c4、C8、C18)或苯基的硅烷化试剂反应，生成表面具有烷基或苯基的非极性固定相。如共价结合到载体上的直链碳氢化合物正辛基等。
关于反相色谱的分离机理，吸附色谱的作用机制认为溶质在固定相上的保留主要是疏水作用，在高效液相色谱中又被称为疏溶剂作用。根据疏溶剂理论，当溶质分子进入极性流动相后，即占据流动相中相应的空间，而排挤一部分溶剂分子。
当溶质分子被流动相推动与固定相接触时，溶质分子的非极性部分或非极性因子会将非极性固定相上附着的溶剂膜排挤开，而直接与非极性固定相上的烷基官能团相结合(吸附)形成缔合络合物，构成单分子吸附层。
这种疏溶剂的吸附作用是可逆的，当流动相极性减少时，这种疏溶剂斥力下降，会发生解缔，并将溶质分子解放而被洗脱下来。
参考资料来源：百度百科-反相高效液相色谱
反相高效液相色谱的主要优点？1.几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。反相色谱法适于分离非极性,极性或离子型化合物,大部分的分析任务皆由反相色谱法完成；
2.具有柱效高，使用寿命长，重现性好，几乎对各种类型的有机化合物都具有良好的选择性，用可用于梯度洗脱操作
3.反相色谱应用广泛，技术方面也比较成熟，可以与大多数检测器相匹配
反相高效液相色谱法与高效液相色谱用的仪器是不是一样一样的，反相的意思是高效液相色谱仪运行的流动相是反相溶剂。当然，用异丙醇过渡后也可以流正相溶剂。另外，色谱柱选择时也有正相，反相之分。
反相高效液相色谱法主要优点这个不能这么说啦!反相还是正相、又或者是什么样的流动相和色谱柱，不好说哪个更好，主要看你做什么样品了，当然同种类型色谱柱由于键合不同等原因会有优劣之分。
应该是说反相高效液相色谱法主要特点：
目前应用最广，属于通用型液相。主要用于农药、氨基酸、低聚糖、肽和分子量不大的蛋白质。
相对来说正相高效液相色谱法用得少些，主要用于甾醇、类脂化合物、磷脂类化合物、脂肪酸。
正相相比反相只是说用得更多些，我的切身体会比如脂肪酸用反相做分离效果就不如正相。所以说不能说谁优于谁。
反相高效液相色谱法与高效液相色谱法有什么不同？高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法。
正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性，也就是以及性键合相为固定相（常以氨基、氰基键合相等作为固定相）。
反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性，也就是以非极性键合相为固定相（常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作为固定相）。

反相高效液相色谱法 反相高效液相色谱

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