包涵体肝炎的症状与治疗包涵体

什么是包涵体，怎样避免包涵体的产生包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程，依赖于蛋白质的折叠速率和聚集速率，并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统，高的诱导剂浓度，相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。除了外界因素，包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为，而不是蛋白的通常特性，如大小，融合标签，相对的疏水性。尽管如此，限制折叠速率的结构特性，如二硫键的形成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤（并不绝对，因为有些蛋白质二硫键的破坏并不影响其功能），富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构，当高
水平表达时，由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境，蛋白质容易形成错配的二硫键，
这常常是包涵体形成的主要原因。膜蛋白具有暴露的疏水区，表达时易于聚集形成包涵体，也有可能由于降解或对细胞的毒性作用使得表达水平极低。蛋白质的糖基化可以影响到蛋白质的折叠行为和溶解性，当它们在原核系统进行表达时，也容易聚集。
防止包涵体常用的方法：
使用中等强度或弱的启动子，低温培养，有限的诱导，优化培养基条件，进行融合表达，
与伴侣分子和折叠酶共表达，表达定位于不同的空间，选择突变的菌株或其他的原核表达系统。
增加蛋白质折叠的添加剂：
添加剂
可能的作用机制
甘油
对蛋白质具有优先的水合作用
/增加黏度L-精氨酸两亲分子/
渗压剂甘氨酰甜菜碱
/
山梨糖醇对蛋白质具有优先的水合作用
阿拉伯聚糖增加黏度
木糖醇增加黏度
乙醇调节极性
DMSO调节极性
两性离子表面活性剂（Zwitterionic detergents）
保护非极性表面Triton X-100保护非极性表面硫代甜菜碱类物质（NDSBs）保护非极性表面蔗糖/海藻糖对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度N-氧化三甲胺（TMAO）对蛋白质具有优先的水合作用/渗压剂三氟乙醇（TFE）促进二级结构的形成低浓度盐酸胍使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性低浓度尿素使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性配体稳定天然结构状态聚乙二醇保护熔球体（molten globule）/增加黏度需要强调的是在培养细菌时，在培养基中加入5％的乙醇可以起到一定的防止包涵体产生的作用。
对比另外一篇文章：
减少包涵体形成的策略
1. 降低重组菌的生长温度，降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法，较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用，从而可减少包涵体的形成。
2. 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂，培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应，在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输，其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇（诱导热休克蛋白的表达）、低分子量的巯基或二硫化合物（影响细胞周质的还原态，从而影响二硫键的形成）和NaCl 。
3. 供给丰富的培养基，创造最佳培养条件，如供氧、pH等。
包涵体名词解释包涵体即表达外源基因的宿主细胞,可以是原核细胞,如大肠杆菌；也可以是真核细胞,如酵母细胞、哺乳动物细胞等.包涵体是病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见.多为圆形...

文章插图
包涵体是什么？【包涵体肝炎的症状与治疗包涵体】病毒的种类繁多，侵入宿主细胞后对细胞的作用也不相同，大体有3种情况。①由杀细胞病毒引起感染细胞的破坏或死亡；②由非杀细胞病毒引起稳定感染，宿主细胞陆续释放病毒，但很少或不影响宿主细胞的代谢与增殖，如以出芽方式释放的RNA病毒所引起的感染；③引起细胞转化，宿主细胞无限制的增殖引起肿瘤或癌变。但宿主细胞最典型的形态学变化为包涵体的产生。包涵体是病毒感染宿主细胞后在细胞内所形成的在光学显微镜下可见的小体。包涵体是蛋白质性质的，多数病毒的包涵体由病毒粒子组成，少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。一个包涵体含有一到数个病毒粒子，也有不含病毒粒子的。包涵体为圆形、卵圆形或不定形，在细胞中呈现大小、数量不一。而且不同病毒在细胞中所形成包涵体的位置不同，有的在细胞质内形成，有的在细胞核内形成，也有的在细胞质和细胞核内部形成。包涵体可用于病毒的辅助诊断和某些病毒的鉴定。

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